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第134章 黎明前的测序(3/4)

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在台面上,枪的钮。

枪尖准悬停在无相的中央,缓缓取了400微升的,移一个全新的无酶离心中。

全程,江河的手没有一丝颤抖。

外科医生的定力,在这一刻展现得淋漓尽致。

陆晓林在旁边看得发麻。

——哪怕是浸实验室多年的老研究员,悬空相时也难免会有细微的晃动,但江河的手就像是被焊死了一样,稳得可怕。

“加积的异丙醇,陈浩,递冰盒。”

样本在冰上静置了10分钟后,再次放冷冻离心机。

12000转,10分钟。

再次取时,现了一半透明胶状沉淀。

“rna沉淀来了。”程溪瑶隔着护目镜,睛亮了起来。

江河:“弃上清,加1毫升75的冰乙醇洗涤沉淀。”

轻轻悬浮沉淀后,第三次离心。

7500转,5分钟。

最后,用移枪极其小心地走所有的乙醇,将离心放置在超净台的通风

“风5分钟,不能透,否则很难溶解。”

五分钟后,江河加20微升rnase-free的,轻轻打。

“去测度。”江河把样本递给陆晓林。

陆晓林拿着样本走到nanodrop分光光度计前,取了一微升滴在检测基座上,放悬臂。

电脑屏幕上立刻一条曲线。

度120 ng/μl,a260/280比值202。”陆晓林声音迅速,“师弟,提取极其完!纯度极,没有白和苯酚污染!”

陈浩几个人地松了一气,互相对视了一

到了!

江河毫不犹豫,:“立刻行逆转录,rna极易降解,必须上把它变成稳定的cdna。”

“引用什么?”陆晓林问。

“用随机六聚(rando hexars)全转录本的逆转录。”

江河走到冰箱前,拿逆转录试剂盒:“不需要特异,我们在pcr阶段再用甲通用的ha(血凝素)和na(神经氨酸酶)保守区引去钓目标片段。”

看着手里的试剂,江河神微动。

其实,如果这真的是一完全未知的全新病毒,今晚的这几个小时本连门槛都摸不到。

光是引设计就能卡死全中国最尖的实验室两周时间。

但他不一样。

他记得h1n1的基因图谱,也知它的外白弱,包括它最容易被哪扩增。

基本就等同于,拿着标准答案,反向推导解题步骤。

所以效率才能这么

逆转录反应制完毕。

pcr仪。

42c孵育60分钟,70c加5分钟灭活逆转录酶。

凌晨5:30。

逆转录完成。

极其脆弱的rna终于变成了相对稳定的dna。

“准备pcr扩增反应。”

“我们要分别扩增它的ha基因、na基因、基因以及pb1基因片段。”

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